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尊敬的澳门最新游戏网站平台大全游戏网站动物及多糖多酚双超mix粉丝：

非常感谢您对澳门最新游戏网站平台大全游戏网站的支持和对新事物的拥抱，使用前请认真阅读《温馨提示》和《操作说明书》。

动物及多糖多酚双超mix （MF899）使用“温馨提示”：

• 动物及多糖多酚双超mix （MF899）含有三个组分：一个是裂解液叫“加强型扩增最佳伴侣”（MF859-plus），一个2xPCRmix叫“动物及多糖多酚双超mix”，还配带了一管ddH₂O，方便使用。

• 本产品免基因组DNA提取：“加强型扩增最佳伴侣”的作用是为了裂解细胞，释放出DNA当模板（请摸索最适合您实验的最佳伴侣和样本的比例关系：样本太多会超出最佳伴侣的处理上限，导致裂解不完全；样本太少会造成模板浓度过低，导致PCR失败）。因为裂解液在特殊的情况下需要20-50ul，而标准裂解是20ul处理体系，可能会有客户单独购买裂解液的需求，所以也可以单独购买。

• 在您收到本产品后，打开包装，将“加强型扩增最佳伴侣”取出放在室温，使用前看看是否有沉淀，一定要确保裂解液没有沉淀，否则按说明书在37度溶解澄清后使用。

• 样本处理量：菌液、菌体和液体样本，推荐是10ul处理体系。而植物和动物组织，推荐是20ul加入1-2平方毫米的样本，对于比较难处理的组织可以用50-100ul裂解液。务必采用适合的研磨方式来破碎组织，让细胞充分破裂释放DNA。

• 研磨小技巧：1）将蓝枪头用火灼烧融化成自制的“研磨杵”，在2mlPCR管中研磨幼嫩组织或者昆虫；

            2）成熟叶片或较大组织，加入50-100ul裂解液在1.5ml 离心管中用研磨杵旋转挤压破壁；

            3）种子或很厚样本（杨树叶片）需要先用液氮研磨，再取少数样本加入50-100ul裂解液；

（可以通过看裂解液的颜色来判断是否充分破碎）

• 沸水浴处理3-5分钟，如果实验室没有沸水浴，也可以用PCR仪98度处理3-5分钟。

• 12000rpm离心1-2分钟，取1-2ul做PCR模板，剩余的放在-20度保存一个月以上，以备后续再次检测。再次取出做模板时，务必12000rpm离心1-2分钟才能取上清1-2ul做PCR模板。

• 本产品主要针对多糖多酚的植物样本（比如棉花、烟草、番茄、杨树和一些海藻）和动物鼠尾、脚趾等样本，在沸水浴冷却到室温，然后12000rpm离心2分钟取上清。

• PCR程序设置：把PCR延伸速度降下来，平时是5-10秒/kb， 现在要变成30-60秒/kb， 因为在粗提物为模版的PCR中速度慢，好比类似在水里跑步和陆地跑步！

• PCR循环数：CTAB提取的DNA纯度高，浓度大，而本产品处理的DNA模板是粗提物，循环数要比以前用CTAB模板增加2-3个循环，效果会好很多

M5 动物及多糖多酚双超mix（无需提取基因组DNA）说明书

产品名称                  单位          货号

M5 动物及多糖多酚双超mix          1 ml         MF899-01

M5 动物及多糖多酚双超mix       10×1 ml        MF899-10

M5 动物及多糖多酚双超mix      100×1 ml        MF899-100

【储存条件】

动物及多糖多酚双超mix长期保存请置于-20˚C，有效期24个月。经常使用，可置于4˚C保存至少六个月。

直接扩增最佳伴侣，收到后置于常温保存，如果4˚C或-20˚C保存出现结晶，请将该试剂置于 37℃水浴中重新溶解后摇匀使用。

【产品简介】

本产品包含澳门最新游戏网站平台大全游戏网站特制的加强型M5动物及双超mix直接扩增最佳伴侣，可以迅速裂解酵母、农杆菌、革兰氏阳性菌、放线菌等微生物的细胞壁，短暂煮沸后的液体可以直接作为PCR模板；同样可以用于动植物组织细胞样品的裂解，尤其是多糖多酚物种，是各种粗样品直接PCR的必备神器，可兼容普通Taq酶或高保真酶的下游PCR扩增。

本产品包含澳门最新游戏网站平台大全游戏网站特制Best W5 HiPer High-Fidelity DNA Polymerase、dNTPs、MgCl₂、反应缓冲液、PCR反应的增强剂、优化剂以及稳定剂，浓度为2×。Best W5 HiPer High-Fidelity DNA Polymerase比普通Taq酶扩增效率高、错配率低，具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好、扩增速度快（30-60秒1kb）等优点。可最大限度地减少人为误差，可用于高特异性PCR反应及GC含量较高（>60%）具有二级结构等复杂模板的扩增和大规模基因检测。PCR 产物是平末端，纯化后可直接用于TA 载体克隆(货号MF021或MF022)。 本产品有含红色染料，在PCR 反应完成后，不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳；也可经过纯化处理，以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。红色染料可指示电泳进程，其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与800 bp 双链DNA 片段相近。

【产品组份】

                                 储存温度    MF899-01    MF899-10    MF899-100

2x M5动物及多糖多酚双超mix      -20˚C         1 ml        10x1ml       100x1ml

M5加强型动物及多糖多酚最佳伴侣   常温         2 ml        10x2ml       100x2ml

Nuclease-free ddH₂O               常温         1 ml        10x1ml       100x1ml

【适用范围】

 1.基因检测：本产品不同批次之间误差很小，特别适合大规模基因检测、半定量PCR实验和微量DNA的检测。

2.用于从复杂模板中如基因组等扩增PCR产物，如表达基因的克隆、基因的定点突变和细胞内基因点突变的分析（SNP）等。

【所需试剂】

使用者仅需准备PCR反应的模板和引物等。

【样本处理方法】

• 裂解液处理组织样品时取样切勿太多；

B、裂解液处理后的用做PCR模板，加入的量不要超过PCR体系的1/10。

1、 菌液样品

将培养至对数生长期的菌液（酵母、革兰氏阳性菌、农杆菌、放线菌培养液等）以菌液和裂解液体积比1:2混合（5ul菌液：10ul最佳伴侣），直接沸水浴3-5分钟，短暂离心后取1-2µl作为后续PCR模板。

2、 平板上的菌落

用灭菌枪头挑取少量菌体，加入10 µl最佳伴侣，吹吸混匀，95 ˚C或沸水浴3-5 分钟，12000rpm离心1-2分钟，取1-2µl作为后续 PCR模板。

3、血液或其他液体样品（尿液、组织液或者各种体液）

以液体样本和裂解液体积比1:2混合（5ul样本：10ul最佳伴侣），95 ˚C或煮沸3-5分钟，12000rpm离心1-2分钟，取1-2µl作为后续PCR模板。

4、植物组织样品（幼嫩叶片，果实、种子、根组织等）

棉花、烟草、杨树、番茄、柑橘等多糖多酚类样本，取2-3mm²样本加入30-50ul裂解液，将固体样品尽量研磨，煮沸5分钟，12000rpm离心2分钟，取1-2µl作为后续PCR模板。

5、动物组织样品（鼠尾、鼠耳等组织）

1-2mm²样本加入30-50ul裂解液，将固体样品尽量研磨，煮沸3-5分钟，12000rpm离心2分钟，取1-2µl作为后续PCR模板。

6、 土壤等环境组织样品

1-2mm²样本加入30-50ul裂解液，将固体样品尽量研磨，煮沸3-5分钟，12000rpm离心2分钟，取1-2µl作为后续PCR模板。

【PCR程序设置注意事项】

* 以粗提物为模板做PCR，因为模板量更少，循环数应比用CTAB提取DNA做模板PCR循环数多2-3个循环。

** 以粗提物为模板做PCR，杂质比较多类似在水中跑步，降低扩增速度有利于得到稳定结果，建议延伸速度60秒/1kb。

【备注】

本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。